产品货号：
KL251009
中文名称：
指甲样本RNA提取试剂盒(沉淀法)
英文名称：
Nail RNA Extraction Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品是专门用于从指甲样品中提取RNA的试剂盒，得到的RNA可以直接用于RT-PCR，由于提取的指甲RNA的量较少，故不适用于电泳检测。
- 即开即用，客户无需从零开始准备各种试剂。
- 能回收痕量的RNA。
- 只能提供PCR级RNA，不能用于高通量测序。
- 本制品足够50次指甲RNA提取，每次可以处理50mg指甲，可得到约50～200ng的RNA。
- 本制品只能用于科研。
| 包装 | 组分 | 规格 | 保存 |
| 包装一 | 指甲RNA提取溶液A | 50mL | 室温 |
| 指甲RNA提取溶液B | 25mL×2 | ||
| 指甲RNA提取溶液C | 50mL | ||
| 指甲RNA纯化还原剂 | 5mL | ||
| EDTA溶液(0.5M,pH8.0) | 1mL | ||
| 锉刀(角质核酸提取专用) | 1支 | ||
| 超纯水 | 1mL | ||
| 包装二 | 蛋白酶K溶液(10mg/mL) | 1mL | -20℃ |
| RNase-free DNase I(1U/μL) | 50U | ||
| 10×RNase-free DNase反应缓冲液 | 250μL |
保存：包装一置于室温，包装二置于-20℃，有效期一年。
研钵，液氮，75%乙醇，RNase-free离心管。
一、样本制备：
- 用锉刀（角质核酸提取专用）对指甲进行打磨并收集指甲粉末约50mg，或称量50mg指甲，将其剪成芝麻粒大小后放入研钵中。
- 加入少量自备液氮，迅速研磨成粉（可选做，非锉刀磨取的较大块状指甲建议进行此步骤）。
- 转移到2mL塑料离心管中。
- 加入1mL指甲RNA提取溶液A、50μL指甲RNA纯化还原剂和20μL蛋白酶K溶液（10mg/mL），55℃保温6小时左右（根据指甲消化状态确定）。最好让反应体系处于摇晃状态，或每隔一定时间对反应体系进行混匀，此保温长度一般可以让指甲溶化。
二、RNA提取
- 在上步所得离心管中加入1mL的指甲RNA提取溶液B，在振荡器上振荡30秒混匀。
- 室温12000×g离心5分钟。
- 将上清液（约0.6mL）转移到另一干净的2mL塑料离心管中。
- 加入等体积的指甲RNA提取溶液C（C溶液如有沉淀，则涡旋混匀后取用即可），上下颠倒30秒充分混匀。
- 室温14000×g离心10分钟，弃上清。
- 在沉淀中加1mL自备的75%乙醇。
- 14000×g离心3分钟，小心吸弃上清。
- 再短暂离心，小心吸弃残留的上清。
- 加入30μL超纯水溶解沉淀，所得溶液即为RNA样品。
三、DNA去除
- 本制品不建议使用OD进行浓度测量，如后续RT-PCR引物未横跨内含子区，不能区分DNA和RNA则建议使用RNase-free DNase I对上述得到的溶液进行去DNA处理。使用方法如下，以50μL体系为例：
成分 用量 无核酸酶水 14μL 10×RNase-free DNase反应缓冲液 5μL RNA溶液 30μL RNase-free DNase I(1U/μL) 1μL - 37℃孵育10min。
- 向体系中添加终浓度为5mM的EDTA终止反应，所得产物可以立即使用或存放于-80℃待用
- 本试剂盒提取的RNA为PCR级，不能用于高通量测序。
相关搜索：指甲样本RNA提取试剂盒(沉淀法)，Nail RNA Extraction Kit